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染色體步移試劑盒實驗時哪一步關鍵！

產品說明：

染色體步移技術（Genome Walking）是一種重要的分子生物學研究技術，使用這種技術可以有效獲取與已知序列相鄰的未知序列。染色體步移技術主要有以下幾方面的應用：  

1.根據已知的基因或分子標記連續步移，獲取人、動物和植物的重要調控基因，可以用于研究結構基因的表達調控。如分離克隆啟動子并對其功能進行研究；

2.步查獲取新物種中基因的非保守區域，從而獲得完整的基因序列；

3.鑒定T-DNA或轉座子的插入位點，鑒定基因槍轉基因法等轉基因技術所導致的外源基因的插入位點等；

4.用于染色體測序工作中的空隙填補，獲得完整的基因組序列；

5.用于人工染色體PAC、YAC和BAC的片段搭接。

本試劑盒是一種根據已知基因組 DNA 序列，獲取側翼未知序列的試劑盒。相對于其它傳統方法，本試劑盒具有、簡便、特異性高、靈敏度高、一次性獲得的未知序列較長等特點。其主要原理是根據已知DNA序列，分別設計三條同向且退火溫度較高的特異性引物（SP Primer），與試劑盒中提供的四種經過*設計的退火溫度較低的兼并引物，即 ZFP1、ZFP2、ZFP3、ZFP4、ZFP5、ZFP6、ZFP7、ZFP8、ZFP9進行熱不對稱 PCR 反應。

通常情況下，其中隨機選四種至少有一種兼并引物可以與特異性引物之間利用退火溫度的差異進行熱不對稱 PCR 反應，通過三次巢式PCR 反應即可獲取已知序列的側翼序列。如果一次實驗獲取的長度不能滿足實驗要求時，還可以根據次步移獲取的序列信息，繼續進行側翼序列獲取。此外，本試劑盒中還含有 Control DNA 及 Control Primer，可以方便進行 Control 實驗。

產品特點：

★配備9對隨即引物，一次性獲得的未知序列，結果真實性達9999%。

★高擴增性： 擴增成功率、產物特異性、產量均有顯著提高。  

★長片段擴增性： 長步移可達3.2kb，通常情況下，一次可步移1.5 kb左右；而T公司的染色體步移試劑盒只能步移200-500bp。

★提高工作效率：巧妙引物設計（免去了酶切和加接頭等繁瑣的實驗步驟）, 12小時即可完成PCR擴增到轉化克隆的全過程。干一天的工作等于以往三天的工作量。

染色體步移試劑盒實驗時哪一步關鍵！